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亲和层析相关内容介绍

亲和层析相关内容介绍

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  • 发布时间:2022-09-01 10:26
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【概要描述】  亲和层析是一种基于蛋白质与色谱基质上特定配体的可逆相互作用的纯化技术。亲和层析选择性高,可以达到高分辨率,可以快速处理大量样品。因此,它常被用作蛋白质纯化的优选步骤。

亲和层析相关内容介绍

【概要描述】  亲和层析是一种基于蛋白质与色谱基质上特定配体的可逆相互作用的纯化技术。亲和层析选择性高,可以达到高分辨率,可以快速处理大量样品。因此,它常被用作蛋白质纯化的优选步骤。

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  亲和层析是蛋白质纯化中的常用技术。了解蛋白质纯化可以从亲和层析开始。

  亲和层析是一种基于蛋白质与色谱基质上特定配体的可逆相互作用的纯化技术。亲和层析选择性高,可以达到高分辨率,可以快速处理大量样品。因此,它常被用作蛋白质纯化的优选步骤。

  亲和层析是样本采集阶段的理想技术。只要感兴趣的蛋白质具有合适的配体,亲和层析就可以用于纯化。由于亲和层析具有高选择性、高分辨率和高容量、高活性物质回收率的特点,因此可以节省大量的纯化时间,用较少的纯化步骤从复杂的生物混合物中纯化目的蛋白。

  亲和层析中的常用术语:

  基质:配体与基质结合,基质应该是物理和化学惰性的。

  间隔基:在配体和基质之间,用于克服可能的空间效应,提高配体和靶分子之间的结合。

  配基:可以可逆地与特定的靶分子结合。

  结合:通过优化缓冲液条件,目标分子和配体分子可以有效地相互作用,目标分子可以很好地保留在亲和介质上,而其他分子则流出层析柱。

  洗脱:通过改变缓冲液条件来削弱目标分子与配体的结合,使目标分子离开介质,流出层析柱。

  亲和层析主要分为标签蛋白纯化、抗体纯化和其他亲和层析。

  常用的标签有His、GST、MBP、Strep(II)等。每个标签都有自己的特点。Cytiva为重组标签蛋白的纯化提供了多种色谱填料。


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